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液相色谱法检测铁皮石斛中甘露糖

提供者:河南奥普斯仪器设备有限公司   发布时间:2019/11/22  阅读次数:192次   进入该公司展台

 【铁皮石斛】
铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛 Dendrobiumoffi---cinale Kimuraet Migo 的干燥茎,具有益胃生津,滋阴清热之功效,因其特殊的生存环境和卓著的滋补功效名列“中华九大仙草”之首。由于石斛药材在化学成分和结构组织上具有一定相似性,使鉴定和质量评价工作较困难。目前常用的方法之一是高效液相色谱法,《中国药典》2015 部规定:供试品色谱中,甘露糖与葡萄糖的峰面积比应为(2.4~8.0);所采用高效液相色谱的理论塔板数按甘露糖峰计算应不低于4000;按干燥品计算,含甘露糖(CHO)应为(13.0~38.0)%。
【样品制备】

(校正因子计算) 取盐酸氨基葡萄糖适量,配置成 1ml 含 12mg 的溶液,作为内标溶液。另取甘露糖对照品置于容量瓶中,加入内标溶液,加水适量使溶解并稀释至刻度,摇匀,吸取 400μl,加 入 PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)甲醇溶液与氢氧化钠溶液各 400μl,混匀,加热水 浴反应。再加盐酸溶液混匀,用三氯甲烷洗涤,弃去三氯甲烷液,水层离心后,取上清液 10μl,注入液相色谱仪,测定,计算校正因子。

(铁皮石斛样品制备)取本品粉末 0.1219g,置提取器中,乙醇加热回流提取,弃去乙醇液,药淹挥干乙 醇,滤纸筒拆开置于烧杯中,加水再加入内标溶液,搅拌下煎煮小时,室温加水、混匀,离 心,吸取上清液适量置顶空瓶中,加盐酸溶液、封口,混匀、水解、放冷,用氢氧化钠溶液 调节 pH 值至中性,取上清液注入液相色谱仪,测定,即得。
仪器配置】
APS80-16PLUS全自动二元四通道高效液相色谱仪,紫外检测器
【色谱条件】

色谱柱:APS C18-2柱

缓冲液:0.02mol/L 乙酸铵溶液

流动相:乙腈:缓冲液=20:80

流速:1.0ml/min;

进样量 20μL;

柱温:室温;

检测波长:250nm
【结果分析】

对谱图进行积分,输入内标物含量及甘露糖含量,由APS操作软件直接获取校正因子见下表:



对谱图进行积分,输入内标物含量及甘露糖含量,由奥普斯操作软件直接获取甘露糖浓度见下表:


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