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EDTA脱钙液

提供者:青岛捷世康生物科技有限公司   发布时间:2020/7/31  阅读次数:25次   进入该公司展台

 产品简介:

在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋

切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织最好固定之后,

再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱

钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA

是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经

EDTA 脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色,但是该法脱钙速度太慢,一般脱需

要数周至数月。

EDTA脱钙液主要EDTA、磷酸盐等组成,pH 值为 7.2。其优点是:①经

EDTA 脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小。其缺点是:①脱钙速度很慢,不适

合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬;③不宜用化学方法确定脱钙终点。
自备材料:

1 PBS

2 蒸馏水

3 加热装置或微波炉
操作步骤(仅供参考)

1、骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约 5mm。

2、组织固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。

3、组织用蒸馏水洗清洗 3 次,每次 20min。

4 组织转移至 20~30 倍体积的 EDTA 脱钙液中,脱钙 1030 天或更长时间。如果想加

快脱钙速度,可以置于 37℃进行脱钙。如果必要,更换新的 EDTA 脱钙液继续脱钙,

多数组织脱钙 2 周~3 个月即可,每周更换一次直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:

微波炉设在 200W 左右的档位,每次加热 5min,依据组织厚度和密度重复 35min,

中间间隔 35min。

5、用蒸馏水冲洗数次。

6、常规脱水、包埋。
注意事项:

1 厚度 5mm 的骨组织块脱钙时间一般脱钙 10~30 天即可,大多数在 1460 天即可。

2 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过 3740℃,温度过高容易使骨组织造成松

散解体,尤其不可大于 60℃。

3 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应注册免费送体验金平台在不影响组织切片的同时尽量缩短

脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。

4 脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。

5 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的

损伤程度。

6 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。

7 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12 个月有效。

附录:

脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力

感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。

 

 

 

 

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